• Різне

    ДНК-діагностика інфекцій. ПЛР, полімеразна ланцюгова реакція.

    26.09.2015

    ДНК-діагностика: ПЛР-аналіз

    ДНК-діагностика — це один з найбільш сучасних високотехнологічних методів дослідження. ДНК-аналізи широко застосовуються в діагностиці інфекційних захворювань . дозволяючи виявляти навіть поодинокі мікроорганізми в організмі людини.

    ДНК-діагностика об’єднує кілька методів дослідження. найпоширеніший з них метод ПЛР (полімеразної ланцюгової реакції).

    ПЛР діагностика
    Що таке ПЛР

    ПЛР — (Polymerase chain reaction, PCR diagnostics) — розшифровується як полімеразна ланцюгова реакція .

    ПЛР діагностика — це метод лабораторної діагностики інфекційних захворювань, зокрема, цей метод широко використовується для діагностики ЗПСШ захворювань, що передаються статевим шляхом.

    Аналіз методом ПЛР заснований на виявленні в матеріалі дослідження невеликого фрагмента ДНК збудника тієї інфекції, яку підозрює лікар. «Невеликий фрагмент ДНК» — це кілька сотень пар основ ДНК — цеглинок, розташованих в строго певній послідовності, і тому утворюють неповторний візерунок. Для ПЛР-діагностики інфекцій достатньо невеликого фрагмента, оскільки будь-яка ДНК включає в себе не менше декількох тисяч підстав.

    При проведенні ПЛР-аналізу ведеться пошук такого фрагмента ДНК інфекції, який специфічний тільки для даного мікроорганізму. Це означає, що цей фрагмент ДНК «особливий» — він зустрічається тільки у цього мікроба (або групи споріднених мікробів), але не зустрічається ні в одного іншого мікроба.

    Сама полімеразна ланцюгова реакція (плр діагностика) використовується для того, щоб знайдений фрагмент розмножити, клонувати: щоб однозначно «побачити» ці фрагменти ДНК, до закінчення реакції їх повинно бути не менше 10 12 штук.

    Історія відкриття ДНК і розробки методу ПЛР

    Спочатку сам принцип методу полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) був розроблений Кері Мюллисом в 1983р. Відкриття ПЛР стало однією з найбільш визначних подій в області молекулярної біології за останні 20 років, і за розробку ПЛР-аналізу Керрі Мюлліса вже в 1993 р. був удостоєний Нобелівської премії в галузі хімії.

    Появи методу проведення полімеразної ланцюгової реакції передували певні досягнення молекулярної генетики: до того часу вже були розшифровані нуклеотидної послідовності геномів ряду мікроорганізмів та виділено специфічні.

    Також появи ПЛР багато сприяло відкриття унікального ферменту ДНК-полімерази (або taq-полімерази). Саме цей фермент каталізує і «контролює» всі процеси під час проведення аналізу методом ПЛР. Особливість цього ферменту — він термостабилен, виключно термостійкий: він витримує нагрівання до температури кипіння без втрати активності, а «улюблений» його температурний режим під час роботи — 72 про С. Багато реакції при проведенні ПЛР йдуть майже виключно при підвищеній температурі.

    З моменту появи методу, ПЛР-дослідження завойовують все більшу і більшу популярність. Лікарі . лаборанти та мікробіологи, без перебільшення, просто в захваті від цього методу — діагностика плр. За словами лікарів і лаборантів нашого медичного центру «Евромедпрестіж». ПЛР-аналіз простий у виконанні, володіє неперевершеними показниками чутливості і специфічності. Всі ці показники сприяли тому, що діагностика методом ПЛР стрімко поширилася по всьому світу.

    В даний час метод ПЛР-діагностики розвивається семимильними кроками. У всьому світі розвиваються, модифікуються і розробляються всілякі модифікації ПЛР-аналізу. Кожен рік на медичний ринок надходить десятки нових розробок та тест-систем для ПЛР-діагностики, призначених для виявлення нуклеотидних послідовностей різних мікроорганізмів — збудників інфекційних захворювань. Нові розробки для проведення ДНК-досліджень з кожним разом знижують собівартість ПЛР-аналізу, роблячи його доступним для широкого використання в діагностичних і лікувальних цілях.

    Матеріал для здачі ПЛР-аналізу

    Матеріалом для проведення ПЛР-діагностики може служити:

    • зішкріб епітеліальних клітин (зішкріб з уретри у чоловіків і у жінок, зішкріб з цервікального каналу )
    • кров. плазма, сироватка крові
    • біологічні рідини (сік простати. плевральна, спинномозкова, навколоплідна, суглобова рідини, слина)
    • сеча (використовується перша порція ранкової сечі)
    • мокрота
    • биопаты шлунка і дванадцятипалої кишки
    • слиз та інші біологічні виділення

    Як правильно підготуватися до ПЛР-аналізу (ДНК-діагностики)

    Достовірність результатів лабораторної діагностики плр залежить не тільки від досвіду і професіоналізму лікаря-лаборанта, можливостей даної лабораторії, але і від того, чи дотримувався пацієнт рекомендації лікаря, наскільки правильною була його підготовка до проведення аналізу. Насправді нічого складного в правильній підготовці немає. При здачі аналізу методом ПЛР лікарі рекомендують дотримувати наступні правила:

    • За добу до проведення аналізу не жити статевим життям
    • Здача ПЛР аналізу крові проводиться натще, тобто необхідно нічого не їсти, не пити та не жувати жуйку
    • Для ПЛР-аналізу сечі використовується перша ранкова порція, зібрана в чистий, стерильний контейнер

    Термін виготовлення

    Результат ПЛР-діагностики зазвичай можна отримати через 1,5-2 діб після здачі аналізу. Можливе отримання результатів ПЛР-тесту протягом одного дня.

    Нагадуємо вам, що жодна стаття або сайт не зможуть поставити правильний діагноз. Потрібна консультація лікаря!

    Короткий опис статті: плр діагностика інфекцій При діагностиці інфекцій, метод ДНК-діагностики — є найбільш сучасним і високотехнологічним. ДНК-дігностіка дозволяє виявити навіть поодинокі мікроорганізми в організмі людини. Найбільш поширений метод ДНК-дослідження — метод полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР). днк-діагностика інфекцій, плр — полімеразна ланцюгова реакція, метод плр аналізу

    Джерело: ДНК-діагностика інфекцій. ПЛР — полімеразна ланцюгова реакція. Метод ПЛР аналізу

    Також ви можете прочитати